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優化色譜與進樣策略(減少共洗脫、匹配進樣溶劑) 做法:改進色譜分離(柱型、流速、梯度、柱溫),讓目標物與強烈干擾物分開;確保進樣溶劑與初始流動相相容或用稀釋/換相處理樣品,避免強有機溶劑直接沖擊色譜峰形或造成瞬時離子化變化。 優點:從源頭上減少共洗脫干擾,改善峰形與重復性。 提示:對極性/疏水差異大的混樣可選用不同固定相(HILIC/反相);如果進樣溶劑強度過大可先稀釋或用小體積濃縮到溶媒換成弱溶媒。 使用穩定同位素標記內標或合適的內標校正 做法:為每種目標物(或至少代表性化合物組)加入穩定同位素標記的內標(SIL-IS),同源性校正因子可以補償樣品基體、溶劑和進樣/離子化差異。若SIL不可得,可選擇近似結構的化學內標并評估誤差。 優點:能非常有效地糾正不同基體/溶劑導致的響應差異,提高定量準確度與精密度。 提示:內標應盡早加入(最好在樣品前處理之前)以覆蓋提取回收與基體效應;計算基體因子(matrix factor)驗證校正效果。 樣品前處理與稀釋(去除/降低干擾物) 做法:采用固相萃取(SPE)、液–液萃取(LLE)、蛋白沉淀、過濾、或簡單稀釋(dilute-and-shoot)等,去除或降低共洗脫基體組分;必要時減小注入體積或采用在線前處理。 優點:直接降低基體濃度,減少離子抑制/增強,提高靈敏度和壽命。 提示:權衡回收率與純化程度;稀釋雖簡單但會提高LOD/LOQ;SPE方法需優化洗脫條件以兼顧回收與雜質去除。 附加:如何診斷并評估效果(簡要) 用后柱注入(post?column/post?source infusion)某一標準在連續注入溶劑或樣品時觀察信號抑制/增強區間,定位共洗脫物; 計算基體因子(MF = 信號在基體基質中 / 信號在純溶劑中),以及用內標歸一化后的MF比值來評估校正效果。 |
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